二代试管培养液配方比例（二代试管配胚胎的成功率）

培养基配方

1、配方二 马铃薯糖琼脂培养基 把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。

2、一级种培养基配方 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基）：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，酸碱度自然。马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA培养基）：去皮马铃薯200克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升，酸碱度自然。

3、培养基是细胞或微生物生长所需的营养物质的混合物，其成分、pH值、温度和稳定性等方面都需要注意。常用的LB培养基的配方包括酵母提取物、胰蛋白胨和氯化钠，配制步骤包括称量试剂、混合均匀、调节pH值、灭菌和储存等。在使用培养基时，必须注意操作规程，以避免误操作和交叉污染。

4、一级种培养基配方马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基）：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克。水1000毫升，酸碱度自然。马铃薯综合培养基（CPDA培养基）：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，磷酸二氢钾3克，硫酸镁5克，维生素B05毫克，琼脂20克，水1000毫升，酸碱度自然。

5、大量元素成分：硝酸钾KNO3：1900mg/L；硝酸铵NH4NO3：1650mg/L；磷酸二氢钾KH2PO4：170mg/L；硫酸镁MgSO4·7H2O：370mg/L；氯化钙CaCl2·2H2O：440mg/L。

6、过磷酸钙20千克、碳酸钙10千克。（4）干牛粪400千克，稻草或麦秸600千克，豆饼或花生饼或菜籽饼25千克、尿素4千克，硫酸铵7千克，过磷酸钙16千克，碳酸钙15千克。（5）稻草1000千克，鸡粪（或牛粪）100千克，尿素12～15千克，石膏10～20千克。上述培养基成分可因地制宜适当调整，稻草、麦秸可以相互替代。

培养基的配制与灭菌方法说明

1、为了使食用菌能正常生长发育，培养基除了必须有足够的碳、氮营养外，还应注意碳与氮的比例（碳氮比，C/N）。这样既能保证营养生长阶段对营养的需要，也能保证生殖生长的顺利进行。例如，巴西蘑菇培养料适宜的碳氮比（C/N）为28～30∶1，含氮量4%～6%，投料量30～35千克/米2。

2、任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。灭菌是指杀死或消灭一定环境中的所有微 生物 ，灭菌的方法分物理和化学灭菌法两大类。本实验主要介绍物理方法的一种，即加热灭菌。加热灭菌包括湿热和干热灭菌两种。

3、真空法：先把液体培养基浓缩后放入真空干燥器内干燥，然后研磨分装。原理是在真空中的物料被加热，水变成蒸汽挥发然后由仪器收集后排出 2：喷雾法：先把培养基制备成液体后经过喷雾干燥后分装。

4、培养基干粉是有菌的，配置好后，如果不及时灭菌，细菌就会大量繁殖，消耗营养成分，导致培养基失去原有作用，所以必须及时灭菌。

5、高压蒸汽灭菌 1．首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角架相平为宜。2．放回内层锅，并装入待灭菌物品（内装培养基或小的三角瓶），不要装得太挤，以免妨碍汽流通影响灭菌效果，三角瓶口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋温包口的纸而透入棉塞。

培养基的配制是怎么样的?

理化适宜：培养基的pH、渗透压、水活度、氧化还原电位等理化条件要适宜。经济节约：在保证培养效果的前提下，尽量选择廉价且易于获得的原料。配制培养基的步骤 称量原料：根据需要称量适量的干粉培养基或液体培养基原料。

配制固体培养基时，先将上述已配好的液体培养基煮沸，再将称好的琼脂加入，继续加热至完全融化。并不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦。调节pH值用pH试纸（或pH电位计、氢离子浓度比色计）测试培养基的pH值，如不符合需要，可用10%HCl或10%NaOH进行调节，直到调节到配方要求的pH值为止。

配料：配方换算→在容器中加入少量水（蒸馏水，自然水）→按照配方称取各种药品（依次加入）→加足所需水量。溶解：淀粉溶解：少量冷水调成糊状。加热溶解，边加热边搅拌以防止烧焦。调PH：用1N的盐酸或1N的NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤：滤纸或棉花进行过滤。

液体培养基的培养基的配制

称量原料：根据需要称量适量的干粉培养基或液体培养基原料。溶解原料：将称量好的干粉培养基或液体培养基原料加入适量的水中，搅拌均匀。调节pH：用酸或碱调节培养基的pH值至适宜的范围。加水定容：将调节好pH的培养基加入适量的水，使总体积达到要求。

一级种培养基配方 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA培养基）：去皮马铃薯200克，葡萄糖20克，琼脂20克，水1000毫升，酸碱度自然。马铃薯蔗糖琼脂培养基（PSA培养基）：去皮马铃薯200克，蔗糖20克，琼脂20克，水1000毫升，酸碱度自然。

一）麦芽汁培养基的配制 1．培养基成分 新鲜麦芽汁一般为10-15波林。2．配制方法 （1）用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。